1、2011年安装，安装工程师：韩志国 13901914266，meeting@zealquest.com

管理员：肖媛

2、比色皿放在仪器下面抽屉里，请自行取用。

*每次使用前请检查比色皿是否完好，如有任何问题，请第一时间向管理员反映；如管理员自己发现比色皿损坏，则追究最近的使用者的责任。

3、使用时，先开电脑，后开机；使用完毕，先关机，后关电脑。

*PAM所有附件均不可热插拔，开机后不可动任何部件。

4、机器有三个测量模式：荧光（与Phyto-PAM、PAM2100等一样）、P700（光合系统Ⅰ）、荧光+P700。

5、P700：所有分析设定均仿照荧光

①一般不单独测P700，都是搭着荧光测，先把数据留着，等会分析再分析；

②参数设定若只测P700，仿照荧光设定；若同时测荧光和P700，根据荧光设定（可不管P700）；

③P700的信号非常弱，只有荧光的1/20，若测定，需要藻液非常浓，基本都需要离心浓缩，达到藻泥状态；

④P700是通过差式吸收来计算，是种间接反映；

⑤P700测定前比荧光多的步骤：

A 需要调平衡，点击天平或者点击下面那一排中的第二个Bal.，看屏幕右侧P700的+0.00V，一定要为零，如果不为零，则需要自己手动微调；

B 还需点Calib校准。

6、以荧光为例，测量参数的选择设定（Setting中）：

①MODE模式：选择测荧光、P700、荧光+P700，一般选择荧光+P700，先把数据留下来；

②ML测量光：一般用默认值；

③AL光化光（强度和时间需要通过预实验摸索，先随便设定一些参数，跑一个Slow Kinetics）：

A 强度：通过峰的长度判断，Fm’的峰高要在1/3-2/3Fm的范围内，1/2Fm最好；若Fm’的峰高<1/3Fm，则表明光强过大；若Fm’的峰高>2/3Fm，则表明光强过弱；

B 时间：看最后几个峰是否稳定，高度是否一致，最起码最后两个峰的高度要一致，则表明稳定时间足够；若最后两个峰都不稳定，则时间短，需要延长；

*蓝藻、红藻在光化光强度较弱时，照射时间延长，容易出现状态转换，导致Fm’的峰高大于Fm。

④Slow Kinetics慢速光响应曲线：

A Delay时间为40s不用管；

B AL-widths光化光照光时间，需要改；

C 页面左边显示的总的时间要大于右边的总的时间，才能运行。

⑤Sat. Pulse饱和脉冲：

A 不是越强越好，一般来说高等植物设定的强度为8、9、10，约为8000-10000µE，藻类的比较低，一般7就足够了；

B width自己做预实验确定：在mode中选中荧光，打开Fluo.SP和FML，看曲线，达到平台，但平台不太长，即表明选择的width比较好（韩志国用蓝藻做实验，width选择500ms）。

7、设定完毕后进入Slow Kinetics中测曲线：

①选择Ind.Curve，一般都选这个曲线，不选manual；

②点击Start，开始测定；

*测前需要命名和写描述。

③红线表示荧光，蓝线表示P700，若同时测，则双轴图；

④如有任何不懂，按Fn+F1；

⑤有用的数据：第一组+最后一组（一条曲线有很多个点，只需要第一个点和最后一个点），在Report中找，第一组记录Fv/Fm，最后一组记录Y(Ⅱ)、ETR(Ⅱ)直到qL；

*测时需要命名，这样才好从Report中查找数据；

NPQ、qN选中间一个即可，代表同样的生物学意义；qL、qP中选择qL，qP要被淘汰了。

⑥要先在此页面存线（每个点都能保存，导入后所有数据都在），然后再保存Report。

8、设定完毕后进入Light Curve中测曲线：

①测试前需要设定测定的12个点的光强，选点原则是：

A 前密后疏；

B 通过曲线的形状看，曲线全部出现，上升段的点比较密，后面下降段的点不用太多；

②在页面中有个按钮可以看参数，ETR等，在Report中看不到；

*Ik反映的是样品耐受强光的能力。

③拟合参数从页面中的Mode中选两种中的一种拟合方程进行拟合，哪种吻合好，用哪种（自己判断拟合的好）。

 

 

双通道荧光仪使用说明书参见：http://www.ihb.cas.cn/fxcszx/fxcs_xgxz/201203/P020120322524441911803.pdf