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利用透射电镜对微孢子虫进行超微结构观察
2023-05-17 | 浏览量:

 

翁美其

微孢子虫是一类泛在的、成孢子、专性细胞内寄生的真核生物,宿主范围涉及从无脊椎动物到脊椎动物的几乎所有动物类群。作为蚕业、养蜂业、水产业、有益昆虫的重要病原,给相关养殖产业带了巨大的经济损失。迄今已有200余属1800余种的微孢子虫被报道。微孢子虫由于个体微小,成熟孢子具有由蛋白质和几丁质构成的坚固孢壁,采用常规显微镜无法对其进行详细的形态结构观察。透射电子显微镜成像分辨率高,可通过超薄切片观察样品内部超微结构,目前已经广泛应用于微孢子虫的分类鉴定中。

   本研究从模糊秀体溞脂肪组织分离到一种微孢子虫模糊新扇孢虫。采用透射电镜对其整个发育阶段进行超微结构观察。结果显示多核的产孢原质团经分裂生殖形成4-8个单核的孢子母细胞。此时,多核的产孢原质团表面可见电子致密的管状突起。早期孢子母细胞形状不规则,离核,具有少量核糖体,孢壁形成管状突起。后期孢子母细胞胞质致密,极丝和孢壁前体出现。成熟孢子梨形,离核,与宿主细胞质直接接触。蘑菇状的锚状盘位于孢子顶端。一个占据孢子长度三分之一的大的后极泡位于孢子后端。极质体分为两部分,前半部分为紧密排列的片状,后半部分为宽的片状。同型极丝9-11圈,呈2-3列排列。极丝呈现6个连续的不同电子密度的同心圆。孢壁三层,外层为电子致密的外生孢壁,中间为电子透明的内生孢壁,内层为质膜层。外生孢壁分为两层,外层为电子致密的管状突起。


1 模糊新扇孢虫显微观察

                             

 

2 模糊新扇孢虫透射电镜观察

这部分结果和其他结果一起,于2023127日发表于Frontiers in Cellular and Infection Microbiology,题为“Morphological characterization and genetic diversity of a new microsporidium, Neoflabelliforma dubium n. sp. from the adipose tissue of Diaphanosoma dubium(Crustacea: Sididae)”。全文链接:https://doi.org/10.3389/fcimb.2023.1125394 

   致谢:感谢水生所鱼类比较免疫学与健康养殖学学科组博士研究生翁美其对此文的支持!


                分析测试中心电子成像平台业务介绍:

电子成像是以电子束为光源照射样品,通过电子束与样品间的相互作用而建立的一种现代材料分析方法,它主要用来对材料微观形貌与结构进行分析。通常人眼能分辨的最小距离是0.2mm,光学显微镜的分辨率是200nm,而电子显微镜的分辨率可以达到0.2nm。电子显微镜按功能和用途主要分为透射电子显微镜和扫描电子显微镜:透射电子显微镜利用高能电子束透过样品并通过电磁透镜聚焦成像,常用于观察那些用普通光学显微镜所不能分辨的细微物质结构;扫描电子显微镜通过分析电子束打到固体样品表面所产生的电子来观察固体表面的形貌和结构,获得的图像观察视野大、景深长、富有立体感。它们与光学显微镜的主要区别如下表所示:

  分析测试中心目前拥有一台日本Hitachi HT7700透射电镜、一台日本Hitachi S4800扫描电镜和一台德国蔡司Crossbeam 350双束电镜。双束电镜配备了镓离子源,可以获得一系列连续的二维图像,再结合三维可视化软件来重构出样品的三维结构信息,能以更高的分辨率在细胞器水平上观察生物样品的三维结构。

  分析测试中心电子成像平台由肖媛高级实验师负责管理和提供上机测试服务,由邢振飞助理实验师负责样品前处理服务,可以提供材料、蛋白、病毒、细菌、细胞和组织的全链条配套电子成像技术服务,服务案例如下:

1、材料

2、病毒



 

3、细菌



 

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6、原生动物



 

            

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